鞘氨醇-1-磷酸(S1P)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
ELISA Kit for Sphingosine-1-Phosphate (S1P)
- 編號UCEG031Ge
- 物種Pan-species (General,通用) 相同的名稱,不同的物種。
- 實驗方法競爭抑制
- 反應時長2h
- 檢測范圍12.35-1,000ng/mL
- 靈敏度最小可檢測劑量小于等于4.73ng/mL.
- 樣本類型serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價格 ¥ 1974 ¥ 2820 ¥ 12690 ¥ 23970 ¥ 197400
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特異性
本試劑盒用于檢測鞘氨醇-1-磷酸(S1P),經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的鞘氨醇-1-磷酸(S1P)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 94-105 | 98 |
EDTA plasma(n=5) | 81-98 | 86 |
heparin plasma(n=5) | 80-103 | 82 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的鞘氨醇-1-磷酸(S1P),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中鞘氨醇-1-磷酸(S1P)含量的測定值與理論值的比率。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 89-101% | 94-103% | 82-99% | 82-104% |
EDTA plasma(n=5) | 81-94% | 90-98% | 78-96% | 84-97% |
heparin plasma(n=5) | 98-105% | 78-105% | 86-95% | 78-96% |
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)50µL,
加入50µL檢測液A(臨用前配制);
37°C溫育1小時。
3. 洗板3次;
4. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
5. 洗板5次;
6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
7. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
實驗原理
本試劑盒應用競爭抑制酶聯(lián)免疫分析法測定標本中待測物質(zhì)水平。將S1P抗體包被微孔板,制成固相載 體,往包被抗體的微孔中同時加入生物素標記的S1P類似物和待測抗原(標準品或樣本),待測抗原與生物素標記S1P類似物對特異性抗體進行競爭結(jié)合。溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物,然后加入HRP標記的親和素,經(jīng)過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測標本濃度越高,標記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測物質(zhì)含量呈負相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
相關(guān)產(chǎn)品
編號 | 適用物種:Pan-species (General,通用) | 應用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!) |
UCEG031Ge | 鞘氨醇-1-磷酸(S1P)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) | Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection. |
ULMG031Ge | 鞘氨醇-1-磷酸(S1P)等多因子檢測試劑盒(流式熒光發(fā)光法) | FLIA Kit for Antigen Detection. |
參考文獻
雜志 | 參考文獻 |
International Journal of Biochemistry &?Cell?Biology | Quercetin ameliorates pulmonary fibrosis by inhibiting SphK1/S1P signaling [Pubmed:29940125] |
Cell?Reports | Nppb Neurons Are Sensors of Mast Cell-Induced Itch [Pubmed: 30917312] |
Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology | SPNS 2 promotes the malignancy of colorectal cancer cells via regulating Akt and ERK pathway [Pubmed: 31206801] |
Sci Rep | Role of miR-506 in ulcerative colitis associated with primary sclerosing cholangitis [33980925] |
Can J Physiol Pharmacol | The S1PR1 Agonist SEW2871 promotes the Survival of Skin Flap [34310896] |
Andrology | Berberine ameliorates erectile dysfunction in rats with streptozotocin‐induced diabetes mellitus through the attenuation of apoptosis by inhibiting the SPHK1/S1P?… [34674380] |
EBioMedicine | α-Ketoglutarate Inhibits Thrombosis and Inflammation by Prolyl Hydroxylase-2 Mediated Inactivation of Phospho-Akt [34740102] |
Biomedicines | Implication of Sphingolipid Metabolism Gene Dysregulation and Cardiac Sphingosine-1-Phosphate Accumulation in Heart Failure [Pubmed:35052814] |
Sci Rep | Sphk2 deletion is involved in structural abnormalities and Th17 response but does not aggravate colon inflammation induced by sub-chronic stress [Pubmed:35260749] |
Anti-inflammatory activity of non-selective PDE inhibitor aminophylline on the lung tissue and respiratory parameters in animal model of ARDS [] | |
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